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基本的にはアセチル基の検出反応なので
CH3-CO-R
の構造を持つ物質（アセトン、アセトアルデヒド、アセトアニリド）と反応します。例外的に酢酸とは反応しません。
ただし、一部のアルコール（エタノール、2-プロパノール）が持つ
CH3-CHOH-R
の構造は、酸化されるとアセチル基となるため、ヨードホルム反応をします。
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